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艾滋抗原抗体联合检测是什么
更新时间:2022-04-02 14:37:43

  一提到艾滋病,很多人都感觉十分可怕。艾滋病是一种会根据血液及其性生活等许多方法开展散播的病症,很多人平常也搜不愿意和艾滋病患者开展触碰。艾滋病的确是一种十分无法痊愈的病症,身患艾滋病的病人一般 都是觉得十分痛楚。而要开展艾滋病的专业能力检验,就务必要去正规的医院开展艾滋病抗原和抗体协同检验。那麼,HIV抗原和抗体协同检验是怎么做的呢?

  近些年,生物学方式 持续被运用到HIV的检测中,HIV的确诊方式 获得了非常大的进度,dna检测早已变成了HIV试验室确诊的发展前景。

  抗原一般 是在感染后3~8周可以被检验出去。现阶段,大多数运用双抗原体夹心巧克力法,这类方式 具备非常好的协调性和特异性。抗体检测由初筛和确定实验构成,初筛实验呈阳性的务必开展确定实验。酶联吸咐剖析(ELISA)方式 有一定的敏感度,且实际操作简易、迅速,合适对很多试品的检验。因而,是现阶段临床医学通用性的初筛检验方式 。国际性上面有3种确定实验方式 ,包含免疫印迹实验、杂带免疫力实验及免疫荧光实验,现阶段以免疫印迹实验更为常见。

  在潜伏期,病毒抗体不可以被验出,但能够检验到病毒感染有关抗原体或分离出来病毒感染。抗原体可以在个人感染后在于血细胞转换2~18d被检验到。因而,在血细胞转换期根据检验p24抗原体拥有非常大的优点,能够做为初期輔助确诊HIV感染的一种方式 。

  病毒培养是检验HIV感染最精准的方式 。一般采用塑造外周血单个核细胞(PBMC)的方式 开展HIV的确诊。

  病毒感染dna检测一般 是根据检验HIVRNA水准来体现病毒载量,具备很高的敏感度,应用适度莹光聚合酶链反应(PCR)技术性,可以在HIV感染的前2周检验到病毒核酸。病毒感染dna检测方式 可用以HIV的初期确诊,如潜伏期輔助确诊、现病史监管、具体指导治疗方案及功效测量、预测分析病症过程等。现阶段常见的测定法有逆转录PCR试验(RTPCR)、核苷酸编码序列增加试验(NASBA)、支系DNA混种试验(bDNA)等。应用高灵敏的适度莹光PCR技术性,可以在HIV感染的前2周检验到病毒核酸。

  一、HIV抗原、抗原体检验

  HIV抗原一般在人感染后几个星期慢慢出現,可持续至终身,血清学实验分成初筛和确定实验。最常见的初筛实验和确定实验分别是酶联免疫吸咐实验和免疫印迹实验(WB)。基本实验方法:酶联免疫吸咐实验、免疫印迹实验(WestBlot)、间接性免疫荧光法(IFA)。快速检测方式 :果胶颗粒物凝结实验、黑斑免疫力融合实验、P24抗原体的检验、生物学方式 、RTPCR测定法、莹光即时PCR无损检测技术、碳键DNA(bDNA)、连接酶酶促链式反应(LCR)、核苷酸编码序列依赖感增加(NASBA)、基因表达介导的增加(TMA)

  (1)酶联免疫吸咐实验

  ELISA法的基本基本原理是免疫力生成物根据有机化学或医学免疫学的方式 产生酶结合物,酶结合物能与待检试品中相对的抗原体或抗原融合变成免疫复合物,随后添加酶底物,经酶的催化反应或水解作用,没有颜色底物造成色调,用人眼、光度计观查結果。初筛用的HIVELISA实验试剂现阶段早已发展趋势到第四代检测试剂。第一代实验试剂关键以病毒感染裂解物或一部分提纯的病毒抗原包被反映板,以检验血细胞中的抗原。因为包被的抗原体不很纯,假阳性率较高。第二代实验试剂应用基因工程技术方式 获得的重组抗原体和合成肽包被反映板,因为提纯抗原体的应用,特异性拥有非常大提升。第三代实验试剂应用双抗原体夹心巧克力法检验抗原,进一步提高了敏感度。第四代实验试剂则在第三代的基本上进一步提升了P24抗原体的检验,把HIV抗原体和抗P24的抗原另外包被反映板,可另外检验血细胞中的HIV抗原和P24抗原体。

  (2)免疫印迹实验

  免疫印迹实验关键用以确定实验,基本基本原理是HIV全病毒抗原历经SDSPAGE电泳原理,将相对分子质量大小不一的蛋白质带分离出来起来,随后再把这种早已分离出来的不一样蛋白质感应起电迁移到硝酸纤维素膜上。将此膜切成条形,每一条硝酸纤维素膜上均带有经电泳分离过的HIV病毒抗原。将待检血细胞试品用封闭液稀释液成1/100,再把它立即加到硝酸纤维素膜上,控温波动,使其充足触碰反映,血细胞中若带有抗HIV抗原,便会与膜条上的抗原体带紧密结合。添加抗人IgG酶结合物和底物后,就可以使有反映的抗原和抗体融合带展现紫褐色,依据出現杂带状况判断結果。有汇报说,免疫印迹实验的特异性并不是非常好,有大概2%的假阳性率,但免疫印迹实验仍然是现阶段最常见的HIV确定实验。

  (3)免疫荧光实验(IFA)

  基本基本原理为运用H9或HUT78塑造体细胞做为媒介,用HIV感染体细胞,该体细胞内便会带有HIV抗原体,将HIV感染的网织红细胞擦抹装片上,固定不动,制取为抗原体片,添加待检血细胞,待检血细胞中的抗HIV抗原与抗原体融合后,再与荧光素标识的抗人Ig融合,在莹光下可看到体细胞内有浅绿色莹光。

  (4)果胶颗粒物凝结实验(PA)

  PA的基本全过程是先将试品稀释液,随后各自添加经抗原体过敏反应的和未过敏反应的果胶颗粒物,搅拌后隔热保温(一般为室内温度)。当血细胞中有HIV抗原存有时,经抗原体过敏反应的果胶颗粒物与抗原产生抗原和抗体反映,依据果胶颗粒物在孔中的凝结状况判断結果。PA实际操作简单,不用独特机器设备,合适对小量标本采集的检验。

  (5)斑点印迹实验(或免疫力层析/或水处理工艺)

  斑点印迹实验一般选用硝酸纤维素膜作固相媒介,用HIV抗原体包被于固相媒介,添加被测标本采集(能为血细胞、血液、尿里和别的),一定溫度反映后洗掉未融合于固相媒介上的标本采集,包被抗原和被检血细胞中抗原融合,用胶体金(或胶体溶液硒)替代底物联接在葡萄球菌蛋白质A上,金标识蛋白质A具备和人Ig融合的工作能力,因此可与被捕捉的HIV抗原融合。若试品中有HIV抗原,则塑料薄膜上便会造成一橙红色黑斑(或线框),一般3~10Min出結果,特异性不错,比较适合于边远地区临床医学用水检验,但不适合大城市地域的捐血员筛选。

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